جداسازی و شناسایی مولکولی کلستریدیوم بای فرمانتانس از برکه‏های بی‏هوازی تصفیه‏خانه فاضلاب

مقدمه: کلستردیوم بای فرمانتانس (clostridium bifermentans) یک باکتری غیر بیماری‏زاست که نخستین بار توسط تیسیر و مارتلی در سال 1992 جدا‏سازی شد. این باکتری به لحاظ تاکسونومی رابطه خیلی نزدیکی با کلستردیوم سوردیلی دارد و قادر به تولید طیف وسیعی از متابولیت‏ها مانند اسید استیک، اسید لاکتیک، اسید فرمیک، اتانول، بوتانول، استن، کربن‏دی‏اکسید، نیتروژن و به ویژه هیدروژن به عنوان یک منبع انرژی پاک‏ است‏. هدف از این پژوهش‏ جداسازی و شناسایی مولکولیکلستردیوم بای فرمانتانس است‏‏.  مواد و روش‏‏ها: برای جداسازی کلستردیوم بای فرمانتانس، نمونه پساب از استخر بی‏هوازی تصفیه خانه فاضلاب مهدی‏شهر بر روی یک محیط سنتزیکمپلکس کشت داده شده و دردمای محیط وتحت شرایط بی‏هوازی قرار داده شد. از باکتری‏های ‏رشد کرده dna کروموزومی جدا‏سازی و با کمک پرایمرهای اختصاصی، ژن 16s rrna آن pcr شد‏. محصول pcr تخلیص و تعیین ترادف بازی شد. در نهایت، برای شناسایی دقیق باکتری جدا شده، ترادف بازی blast شد.  نتایج: باکتری جدا شده از نظر ماکروسکوپی بر روی یک محیط کمپلکس کلونی‏ سفید ایجاد کرد و از نظر میکروسکوپی گرم مثبت میله‏ای شکل و اسپردار بود. نتیجه بررسی تعیین ترادف بازی ژن 16s rrna نشان داد که باکتری جدا شده به گونهکلستریدیوم با ی فرمانتانس متعلق است‏ که در بانک ژن جهانی با نام سویه iri2 و شماره kc525132 ثبت شد‏.  بحث و نتیجه‏گیری: در این پژوهش‏ سویه‏ای از کلستردیوم بای فرمانتانس جداسازی، شناسایی فیزیولوژیک و مقایسه مولکولی 16s rrna شد. با توجه به توانایی این باکتری در تولید فرآورده‏های ‏مختلف صنعتی، از این باکتری می‏توان در تولید هیدروژن به عنوان یک بیوگاز استفاده کرد.